草果提取方法、生物活性与临床应用研究新进展

[摘要]目的：就近十年对草果的新研究现状作一综述，简要分析主要存在的问题，并展望草果的发展前景，为进一步开发和利用壮瑶药材草果提供参考。方法：通过查阅书籍资料，查阅国内外文献，对草果的化学成分、提取方法、生物活性以及临床应用等进行综述。结果：草果丰富的化学成分使其富含抗炎镇痛、抗肿瘤、抗氧化以及抗菌等多种生物活性；提取方法主要以有机溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、超临界CO2提取法以及无溶剂微波萃取法为主；丰富的生物活性使其具有辅助治疗癫痫、治疗慢性肾功能衰竭以及治疗慢性再生障碍性贫血等临床应用。结论：草果的化学成分丰富，在药品、保健品、食品及化妆品等行业具有较好的应用潜力。但大多数前人主要研究草果挥发油成分，为科学合理的开发草果并全面的利用，应拓展研究草果其他的化合物类成分。因此，草果有进一步开发的价值。

　　[关键词]草果；提取方法；生物活性；临床应用

　　草果[1]（Amomum tsao-ko）为姜科（Zingiberaceae）豆蔻属（Amomum）多年生草本植物，它的干燥成熟果实称为草果，是一种重要香料，有特异香气，味辛温，具有燥湿温中，截疟除痰的功效，用于寒湿内阻，胺腹胀痛，痞满呕吐，疟疾寒热，瘟疫发热等症。对草果生物活性的进行探究，必须对其进行有效的提取，提取方法有传统的有机溶剂提取法、水蒸气蒸馏法（SD）、超声萃取法、微波萃取法、超临界CO2流体萃取（SFE-CO2）包括两种方式的合并等新型萃取技术。在近十年的研究中，依据试验结果，草果被证实具有抗氧化、抗菌、抑霉、抗炎、抗炎镇痛、抗肿瘤、降脂和降血糖等生物活性，临床上用于慢性肾功能衰竭、慢性再生障碍性贫血和降低癫痫发作次数都具有良好的治疗和效果。

　　草果广泛分布于中国(广西、贵州、云南)、越南和老挝，主产于云南，属广西常用的壮瑶药材，深受东南亚市场青睐。我国用作草果使用的有[2]：云南产的草果（Amomum tsao-ko）、广西、云南产的拟草果（A.paratsao-ko）和野草果（A.koenigii）。通过查阅历代本草及方书，发现草果(Amomum tsao-ko)与拟草果(Amomum paratsao-ko)其成熟果实经常一起使用，药效也相似，可以相互作为替代品使用，其功效主治与目前基本一致[3]。

　　关于草果挥发油的报道虽多，但就草果挥发油类成分之外的其他化合物的实验研究及报道相对匮乏，故本文就近十年对草果中富含的所有研究报道的化合物在提取方法、生物活性以及临床应用三方面作全面的整理归纳和总结，并做进一步展望，使人们对草果得到更全面和深入的认识，促进草果壮瑶药材的开发和利用。

　　1化学成分

　　黄小玲等[4]采用多种提取方法对其化学成分进行全面的定性研究，发现草果具有丰富的化学成分，如蛋白质、氨基酸、酚类、鞣质、有机酸、皂苷、黄酮、蒽醌、香豆素、内酯、强心苷、甾体、萜类、挥发油、油脂、花青素以及微量元素[5]等多种化学成分。草果作为芳香化湿类的香料，挥发油成为其最主要活性成分，《中国药典》2015年版本把测定挥发油作为评价草果品质的重要指标，挥发油是学者集中研究的成分，发现挥发油所含成分丰富，但主要分为五大类，如单蔽炼类、含氧单蔽类、倍半砲烯烃类。挥发油也称精油（EOs），同时国内外实验研究表明[6~8]，草果全株均含精油，不同产地的草果挥发油的成分有一定的差异，但1,8-桉油素为精油的主要成分。

　　2提取方法

　　随着科学技术水平的提高，植物中草药的提取方法也实现了工艺提升。大量试验研究表明，提取方法的不同对草果成分提取率存在一定的相关性。此外，草果成分的提取率也与其基因型、地理条件、采收时间、提取方法、干燥处理[9]虫害等多种因素密切相关。

　　2.1有机溶剂溶剂提取法

　　李志君等[10]对提取时间、料液比、乙醇浓度、提取温度进行考察草果多酚的提取工艺，并应用Box-Behnken中心组合实验优化，试验结果表明，最佳提取条件为:提取时间150 min、料液比1∶30 g/mL、乙醇浓度60％、提取温度67℃、多酚提取得率为9.69％。

　　王婉愉等[11]考察乙醇浓度、提取时间、液料比、提取温度四个单因素试验对草果黄酮提取量的工艺研究，并应用响应面法Box-Benhnken试验对其进行优化，得到了最佳提取方法：振荡频率为135 r/min，乙醇浓度70％、提取时间4 h、液料比20:1(mL/g)、提取温度61℃，黄酮提取量预测值为1.217mg QE/g。

　　2.1.1微波辅助萃取法(MAE)

　　吕虹霞等[12]考察单因素草果的粉碎粒度、液料比、微波功率、微波处理时间等在MAE条件下草果挥发油提取量的工艺研究，并用正交试验进行优化，得到最佳提取工艺：粉碎粒度60目,液料比(mL/g)8∶1,微波功率600 W,微波处理时间6 min，草果挥发油提取率达到2.89％。

　　闵勇等[13]通过正交试验考察草果挥发油的提取量，发现挥发油的最显著影响为微波功率。试验结果表明，最佳提取条件：液料比15:1、处理时间5 min、微波功率800 W.结论:采用最佳实验条件提取草果挥发油,产率可达2.82%。

　　2.1.2超声波辅助提取法

　　袁圆等[14]采用超声波法辅助提取草果总黄酮工艺研究，通过正交试验对其进行优化，得到最佳提取条件：乙醇60％、料液比1∶50(g/mL)、提取温度40℃、超声功率为160W,提取时间60 min,此时草果黄酮体积分数提取量是24.2 mg/g。

　　仇厚援等[15]通过单因素实验和正交实验设计，得出草果抑菌物质在超声波辅助提取中，最佳工艺条件为：以60%乙醇为提取溶剂、料液比1∶16、浸泡时间20 h，超声波温度55℃、超声波时间45 min，得到的草果提取物提取率为10.5%。

　　2.2水蒸气蒸馏法（SD）

　　何俏明灯[16]采用SD从3个不同批次的草果中分别提取草果果仁及果壳的挥发油，得到草果果仁挥发油分别占挥发油总量的94.8％,95.6％,93.7％；得到草果果壳挥发油分别占其挥发油总量的94.5％,91.5％,91.4％。

　　孟大威等[17]，在草果精油萃取方法的研究实验中，采用SD-乙醚萃取法萃取草果挥发性成分，得到了1.12％平均率得获。

　　张薇等[18]考察SD提取草果挥发油提取率的研究工艺，采用响应面法进行优化，试验结果表明，最佳条件：草果粉末过30.7目筛，液固比9.9倍，蒸馏4.68 h，其挥发油的提取率最高,达2.750％。

　　冯雪等[19]利用SD提取了草果的挥发油，产率为1.62%。

　　2.3超临界CO2提取法（SFE-CO2）

　　熊将等[20]考察SFE-CO2提取草果挥发油工艺研究试验，应用正交试验进行优化，得到最佳提取工艺：萃取压力25 MPa、萃取温度55℃、萃取时间60 min、CO2流量25 L/h，在此条件下挥发油的出油率为2.86%。

　　2.4无溶剂微波萃取(SFME)

　　SFME实验测试中，Gui等[21]发现包括冷凝和收集部分在内的常规蒸馏装置不能彻底降